Para clinique : Méthodes conduisant à une présomption

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Hémogramme
Il révèle une anémie avec parfois auto agglutination des hématies, une hyperleucocytose avec monocytose et surtout plasmocytose. Certains plasmocytes se transforment en cellules plus volumineuses bourrées de vacuoles, muriformes : les cellules de Mott, très évocatrices on peut également les déceler dans la moelle osseuse. La coloration par l’acide périodique et de Schiff montre un pourcentage anormalement élevé de lymphocytes contenant des granulations PAS positifs : jusqu’à 15% des lymphocytes contre 6% au maximum chez le sujet normal.

Protidogramme
Il révèle une augmentation des gammaglobulines, et plus précisément des IgM : le taux sérique de cette immunoglobuline est supérieur à 4 fois le taux normale chez plus de 95% des trypanosomés. En zone d’endémie, cette augmentation des IgM est un signe de forte présomption et incite à la répétition des examens parasitologiques.

 Méthodes immunologiques spécifiques
L’infection chronique par  Trypanosoma brucei gambiense induit la  production d’anticorps circulants dirigés contre plusieurs antigènes du parasite. Ces anticorps peuvent être détectés par des examens immunologiques pratiqués sur le sérum.
La recherche d’anticorps antitrypanosomes dans le sérum des sujets se fait par test sérologique d’agglutination sur carte (card agglutination trypanosomiasis test : CATT) [109], par immunofluorescence indirecte (IFI) et par test immunoenzymatique (enzyme-linked immunosorbent assay : Elisa).
Le CATT, développé en 1978, est le principal outil de dépistage utilisé dans les zones où Trypanosoma brucei gambiense est endémique.
Le CATT sur sang total consiste à mettre en présence des antigènes de trypanosomes, constitués de trypanosomes (Trypanosoma brucei gambiense) entiers et lyophilisés avec le sang de la personne à examiner. Si cette dernière est atteinte de la THA, son sang contient des anticorps spécifiques dirigés contre les trypanosomes. Au contact des antigènes du CATT, ils provoquent leur agglutination qui se traduit par des granulations à la lecture du test. Si elle n'est pas malade, son sang ne contient pas d'anticorps dirigés contre les trypanosomes et il n'y aura donc pas d'agglutination (figure 20). Il faut noter qu'il peut y avoir de fausses agglutinations. C'est pourquoi, un suspect ne peut jamais être déclaré malade sur le seul résultat du CATT. Il faut avoir vu le parasite pour affirmer le diagnostic de THA.
Le CATT sur plasma ou sérum a le même principe que celui du CATT sur sang total; ce test, plus sensible, est utilisé pour diminuer le nombre de faux positifs (suspects sérologiques non malades). On n'utilise pas le sang total du suspect mais son sérum ou son plasma que l'on va diluer avec le tampon fourni avec le réactif CATT servant à le reconstituer.
Les tests sérologiques CATT ne sont, ni sensibles, ni spécifiques à 100 %.
Le manque de spécificité entraîne un trop grand nombre de faux positifs, c'est-à-dire des personnes dont le test est positif alors qu'ils n'ont jamais eu la THA. On peut donner à cela deux explications: soit ces personnes ont été piquées par une glossine qui leur a transmis un trypanosome d'animaux, non pathogène pour l'homme, soit elles souffrent d'une autre affection pour laquelle le test réagit positivement. Ces faux positifs doivent de toute façon passer les tests de diagnostic, ce qui entraîne une augmentation sensible de la charge de travail et des coûts.
Le manque de sensibilité des tests, beaucoup plus grave, entraîne le phénomène inverse: un trop grand nombre de faux négatifs. Ces personnes ont, manifestement, la maladie du sommeil, mais sont négatives aux tests sérologiques. Les causes en sont encore mal connues ; un seul fait est certain : dans certains foyers circulent des variants antigéniques de Trypanosoma brucei gambiense ne réagissant pas aux tests classiques.
Il est clair que ces faux négatifs échappent à l'étape suivante, le diagnostic. Cela revient, lors de la prospection de dépistage, à laisser en place des malades dont la santé va se détériorer jusqu'à l'issue fatale et qui, de plus, vont servir de réservoirs actifs de Trypanosoma brucei gambiense pour toutes les mouches tsé-tsé qui viendront se nourrir sur eux.
Si un fort pourcentage de faux positifs n'entraîne qu'une simple augmentation du travail et donc qu'une légère augmentation des coûts, ignorer involontairement les faux négatifs, quel qu'en soit le pourcentage, équivaut au contraire à entretenir le foyer.



Figure 20 : Le CATT sur sang total (réaction positive dans le cercle n°3) [110].